THP-1細胞吞噬功能驗證：乳膠顆粒與紅細胞實驗

THP-1細胞（別名：THP-1(ATCC)、Tohoku Hospital Pediatrics-1等）是一種源自人急性單核細胞白血病的小鼠單核細胞系，具有典型的單核細胞/巨噬細胞特性。作為懸浮生長的腫瘤細胞，THP-1廣泛用于免疫調控、炎癥反應、吞噬功能及單核細胞分化研究，是免疫學與腫瘤學領域的基礎實驗模型。

核心特性

種屬：人（Homo sapiens）
組織來源：急性單核細胞白血病；單核細胞起源
生長特性：懸浮生長，需離心收集（禁止直接傾倒培養(yǎng)液）
細胞形態(tài)：圓形或橢圓形單核細胞，大小均一
生物安全等級：BSL-1（常規(guī)實驗室安全操作）

培養(yǎng)方案

培養(yǎng)基配方

• 基礎培養(yǎng)基：RPMI-1640（[PM150110]）

• 添加物： 

• 10% FBS（[164210]）

• 0.05 mM β-巰基乙醇（關鍵成分，維持細胞活性）

• 1% 雙抗（青霉素-鏈霉素，[PB180120]）

• 無需額外成分：配方完整，直接使用

培養(yǎng)條件

• 氣體環(huán)境：空氣（95%）+ CO?（5%）

• 溫度：37℃

• 推薦傳代密度：5×10? – 1×10? cells/mL

• 換液頻率：每2-3天更換半量培養(yǎng)基（懸浮細胞無需消化）

關鍵注意事項

1. 懸浮細胞操作： 

• 傳代或換液時需低速離心（800-1000 rpm，5 min）收集細胞，禁止直接傾倒培養(yǎng)液。

• 復蘇后需靜置1-2小時，待細胞沉降后再輕柔混勻。

2. β-巰基乙醇必要性：該成分對THP-1活性至關重要，不可省略。

3. 密度監(jiān)控：細胞密度超過1×10? cells/mL時需及時分瓶，避免營養(yǎng)耗竭。

4. 凍存與復蘇： 

• 凍存液：無血清非程序凍存液（[PB180438]），無需緩慢降溫，直接-80℃過渡后轉入液氮。

• 復蘇要點：快速融化（37℃水浴），離心去除凍存液后重懸。

生物學功能與應用場景

• 吞噬與抗原呈遞：可吞噬乳膠顆粒、酵母聚糖及調理過的紅細胞，適用于吞噬功能研究。

• 分化誘導：佛波醇酯（PMA/TPA）可誘導THP-1分化為巨噬細胞樣表型，用于炎癥模型構建。

• 免疫調控研究：表達補體C3受體與Fc受體，適用于抗體依賴性細胞毒性（ADCC）研究。

• 疾病模型：模擬單核細胞在白血病、動脈粥樣硬化等疾病中的行為。

背景與來源

• 細胞起源：從1歲男性急性單核細胞白血病患兒外周血中分離建立，表面無免疫球蛋白表達。

• 功能驗證：XC斑點形成試驗陰性，無病毒顆粒分泌。

• 保藏信息：ATCC（TIB-202）、DSMZ（ACC-16）、ECACC（88081201）權-威機構保藏。

推薦操作流程

1. 傳代步驟： 

• 收集細胞懸液，800-1000 rpm離心5 min，棄上清。

• 加入新鮮培養(yǎng)基重懸，按1:2-1:4比例分瓶。

2. 凍存技巧： 

• 收集對數(shù)期細胞，離心后用預冷凍存液重懸，直接-80℃保存24小時后轉入液氮。

3. 計數(shù)與接種： 

• 使用血球計數(shù)板或自動細胞計數(shù)儀，維持密度在5×10? – 1×10? cells/mL。

THP-1細胞以其穩(wěn)定的懸浮生長特性與明確的巨噬細胞分化潛能，成為免疫與腫瘤研究中的核心工具。嚴格遵循離心收集與β-巰基乙醇添加要求，可最大限度維持細胞功能與實驗可重復性。