直播答疑 | 細胞培養(yǎng)實驗室的環(huán)境要求和監(jiān)測方法

更新時間：2024-08-29 | 點擊率：2133

普諾賽直播課

在8月20日普諾賽直播間中，左明祥老師為大家?guī)砹?strong style="-webkit-tap-highlight-color: transparent; margin: 0px; padding: 0px; outline: 0px; max-width: 100%; box-sizing: border-box !important; overflow-wrap: break-word !important; visibility: visible;">《細胞培養(yǎng)實驗室的環(huán)境要求和監(jiān)測方法》的專題課程。

直播回放路徑

①可在“武漢普諾賽"微信視頻號查看；

②B站搜索“普諾賽生物"，點擊最新視頻觀看學習。

每一份好奇心都是推動科學進步的力量，針對大家在直播中提出的問題，我們特意邀請左老師為大家進行深入解答。

另外，我們誠摯地歡迎大家在評論區(qū)暢所欲言。無論是實驗技術問題還是感興趣的課程主題，我們都將傾聽您的每一個意見并積極回應，也會根據(jù)大家的需求定制專題講座。感謝您的參與和關注！

直播問題解答

問

過濾器和水盤如何清潔？

在正常情況（未出現(xiàn)污染）下，培養(yǎng)箱的水盤應使用75%酒精擦拭消毒，然后加入無菌水并添加適量的抑菌劑。當培養(yǎng)箱出現(xiàn)污染時，可以使用新潔爾滅消毒液或3%的過氧化氫消毒液對水盤進行消毒，消毒時間為30 min。此外，也可以使用紫外燈進行消毒處理，消毒完成后用無菌水擦拭干凈，添加無菌水和抑菌劑后正常使用。

培養(yǎng)箱內(nèi)的HEPA過濾器一般不需要單獨清潔，當使用出現(xiàn)異常時可以進行更換（需要專業(yè)維修人員更換）。對于超凈工作臺和生物安全柜中的過濾器，只需根據(jù)實際使用情況，定期（半年至一年）更換初效濾網(wǎng)即可。

問

消毒時間多久合適？

使用消毒液消毒，時間30 min左右即可；若使用的消毒液存在腐蝕性，應在消毒完成后使用無菌水將消毒液擦拭干凈。使用臭氧或紫外燈的消毒時間一般也是30 min。

問

怎樣檢測二氧化碳泄漏？

如果需要檢測泄漏至空氣中的CO₂濃度，防止其濃度過高可能引發(fā)的窒息風險，可以使用專門的CO₂濃度檢測儀，或者使用氧氣濃度監(jiān)測儀（適用于多種氣體環(huán)境，如含CO₂或氮氣的）。

如果是要檢測管道泄漏的位置，初步的檢查方法可以是使用肥皂水在管道的接頭位置進行涂抹，觀察是否出現(xiàn)氣泡；如需要準確檢測，則需專業(yè)人員使用專業(yè)檢測工具進行檢測。

問

細胞培養(yǎng)間的實驗服怎么消毒和存放比較合適？

實驗服在清洗完成之后，可以放在專用的滅菌袋中，再放進高壓蒸汽滅菌鍋進行滅菌處理。滅菌完成后，將實驗服連同滅菌袋一起放入烘箱中烘干備用。

問

臭氧消毒適用于什么實驗室？

臭氧消毒適用于配套有新風系統(tǒng)的實驗室。臭氧一般需要通過新風系統(tǒng)進入實驗室空間，并在空間內(nèi)達到一定濃度才能起到較好的消毒效果。消毒完成之后，也需要通過新風系統(tǒng)將殘留的臭氧排出實驗室，否則會對實驗室環(huán)境產(chǎn)生影響。

問

支原體檢測沒有污染，但細胞狀態(tài)不好，考慮什么污染呢？

細胞狀態(tài)不好的因素有很多，首要且關鍵的一步是排除污染因素。如果通過各種檢測手段（細菌、真菌通過瓊脂板或空培檢測，支原體使用試劑盒檢測）都無法檢測到污染，則可能不是因污染導致的。

如果仍懷疑存在污染，可以嘗試向培養(yǎng)物中添加適當濃度的廣譜抗生素。如果添加抗生素后細胞狀態(tài)明顯好轉(zhuǎn)，說明確實存在某種難以檢測的微生物影響細胞狀態(tài)；如果添加抗生素后細胞狀態(tài)未出現(xiàn)好轉(zhuǎn)甚至更差，則需從其他方面排查細胞狀態(tài)不好的原因，如培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)條件、細胞特性或外部操作因素等。