歡迎來到武漢普諾賽生命科技有限公司網站!
咨詢熱線

400-999-2100

當前位置:首頁  >  技術文章  >  細胞學堂 | 手把手教你培養SV-HUC-1

細胞學堂 | 手把手教你培養SV-HUC-1

更新時間:2023-11-14  |  點擊率:1537

SV-HUC-1 (人輸尿管上皮永生化細胞),是由猿猴空泡病毒40轉染至1名11歲男孩的泌尿道上皮細胞,而建立起來的永生化細胞系。其分化特性與正常細胞相似,培養簡單,可無限傳代,卻不屬于腫瘤細胞[1]



基礎信息


?

生長培養基:

Ham's F-12K+10% FBS+1% P/S

?

生長特性:貼壁,上皮細胞樣

?

推薦傳代比例:1:2-1:4

?

推薦換液頻率:2~3次/周

?

培養條件:

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

?

凍存條件:

55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO


SV-HUC-1細胞正常生長

SV-HUC-1細胞正常生長


細胞傳代


01

從培養容器中吸出用過的細胞培養基并丟棄;

02

PBS沖洗細胞(每10cm2培養表面積約2mL 溶液)。從與貼壁細胞層相對的容器一側輕輕加入沖洗液,以避免攪動細胞層,前后輕柔搖晃容器數次;

03

從培養容器中吸出沖洗液并丟棄,向培養瓶中加入0.25%胰酶(試劑量應足以覆蓋細胞層);

04

輕輕搖晃容器,使試劑*覆蓋細胞層,T25 細胞培養瓶留 200μL左右即可;

05

將培養容器放在培養箱中孵育5分鐘左右,在顯微鏡下觀察細胞解離情況;

06

當細胞解離程度≥ 90%時,傾斜培養容器,使細胞上液體盡快流盡,加入所用胰酶兩倍體積的*培養基,吹打細胞層表面數次,使培養基分散;

07

將細胞轉移到無菌離心管中,以 200×g 的離心力離心 3-5 分鐘;

08

用最少體積的*培養基重新懸浮細胞沉淀,將細胞懸液按照推薦比例稀釋,并將適量體積的細胞懸液轉移到新的細胞培養容器中,再將細胞放回培養箱。


注意事項


1、待細胞匯合度達到80%-90%時,即可進行傳代培養;

2、該細胞較難消化,注意延長消化時間。待消化到細胞收縮變圓,輕拍培養瓶側邊,細胞可以滑落方可終止消化;

3、如果使用培養瓶,在將其放入培養箱前,應將瓶蓋旋松,以便進行充分的氣體交換,除非您使用的是通氣式培養瓶和透氣性瓶蓋。


參考文獻


[1] 王惠惠, 陳鋒, 朱佳玉, 席淑華, 孫貴范. 亞砷-酸鈉對SV-HUC-1細胞NRF2通路影響[J]. 中國公共衛生, 2017, 33(1): 95-97.




主站蜘蛛池模板: 久久精品无码一区二区日韩av| 男人使劲躁爽女人动态图| 香蕉一区二区三区观| 中文午夜人妻无码看片| 亚洲精品美女久久777777| 国产亚洲av手机在线观看| 天天爽天天爽夜夜爽毛片| 日本年轻的妈妈| 欧美zozozo人禽交免费大片| 男人操女人的免费视频| 超级无敌科技帝国| 18女人水真多免费高清毛片| 中国jizzxxxx| 久久国产视频一区| 亚洲国产成人精品无码区在线观看 | 麻豆国产精品入口免费观看| 亚洲av无码不卡一区二区三区| 免费在线观看成人| 国产69精品久久久久妇女| 国产猛男猛女超爽免费视频| 国产高清一区二区三区免费视频| 少妇高潮无套内谢| 成人欧美一区二区三区1314| 日本免费人成黄页在线观看视频| 日韩大片在线永久免费观看网站 | 精品偷自拍另类在线观看| 色哟哟最新在线观看入口| 视频在线观看一区| 高潮毛片无遮挡高清免费| 高清在线精品一区二区| 欧美手机在线视频| 国产人成精品香港三级在| 0588影视手机免费看片| 天天在线天天综合网色| 日本免费网站视频www区| 丁香婷婷六月天| 色综合天天综合中文网| 色天使色婷婷丁香久久综合| 青青草91视频| 糖心VLOG精品一区二区三区| 精品国产一区二区三区在线|