細(xì)胞學(xué)堂 | 培養(yǎng)基顏色改變意味著什么

細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基的顏色變化往往對應(yīng)著細(xì)胞狀態(tài)。大多數(shù)情況下，我們所見的培養(yǎng)基都呈紅色，這是因為細(xì)胞培養(yǎng)基的PH值大多在7.4左右，添加了酚紅的培養(yǎng)基的顏色就是紅色。不同成分培養(yǎng)基的顏色會有差異，例如DMEM會比1640顏色深一點，主要是DMEM里面的酚紅含量比1640多導(dǎo)致。當(dāng)然還有部分培養(yǎng)基不含有酚紅，呈現(xiàn)的就是無色或者淡黃色。

圖1：DMEM培養(yǎng)基正常顏色

很多時候，培養(yǎng)基顏色并不是我們所見的紅色，而是偏紫或偏黃，不同顏色培養(yǎng)基究竟對應(yīng)何種細(xì)胞狀態(tài)呢？本期細(xì)胞學(xué)堂將為您揭曉培養(yǎng)基顏色變化的原因。

圖2：使用了一段時間后的培養(yǎng)基顏色偏深

開封了一段時間后的培養(yǎng)基，顏色會比正常深很多，如上圖。主要是因為大部分細(xì)胞培養(yǎng)基所用的緩沖體系為NaHCO₃，培養(yǎng)基開封后NaHCO₃會分解成CO₂溢出，導(dǎo)致培養(yǎng)基偏堿；可以將培養(yǎng)瓶擰松放置于CO₂培養(yǎng)箱中一段時間后，培養(yǎng)基顏色會變正常。

通常培養(yǎng)基里的酚紅指示劑遇酸會變黃，但也有可能是細(xì)胞被污染而導(dǎo)致的培養(yǎng)基顏色變黃，以下為幾種常見情況：

由于細(xì)胞代謝產(chǎn)酸，培養(yǎng)了細(xì)胞后的培養(yǎng)基會從紅變黃，如果培養(yǎng)基是橘黃色，則是細(xì)胞健康生長的顏色，無須擔(dān)心，繼續(xù)培養(yǎng)即可。

圖3：培養(yǎng)細(xì)胞后的培養(yǎng)基顏色

若細(xì)胞狀態(tài)良好，但換液后培養(yǎng)基顏色變黃快，則可能是因為細(xì)胞密度大或消耗過大，提示需要傳代了。

圖4：培養(yǎng)基快消耗完時的顏色

若細(xì)胞狀態(tài)差，生長異常，培養(yǎng)基很快變黃，變渾濁，鏡下觀察有較多小顆粒物，則有可能是細(xì)菌污染（如圖5）或支原體污染。輕度污染可用抗生素清洗處理或使用支原體清除試劑，重度污染建議消殺后丟棄。

圖5：細(xì)菌污染時培養(yǎng)基顏色